慢病毒滴度快速檢測卡(病毒包裝專用)

Catalog_no	BF06202-100
Product_name	慢病毒滴度快速檢測卡(病毒包裝專用)
Size	100個/包
Category	病毒包裝試劑
Price	4220.00
應用	檢測范圍約為0-3000ng（具體以批次報告為準）

說明:本類型檢測卡檢測范圍約為:0-3000ng(本檢測數據僅供參考，具體產品情況請參考相關批次檢測報告)

一、原理

 

 

       本產品是基于膠體金側向層析技術的HIV-1 P24蛋白半定量檢測卡，可以用于相關慢病毒載體和假病毒包裝效率的快速評估（P24蛋白是慢病毒外殼中含量*大的標志性蛋白）。檢測卡由層析膜、樣品墊、金標墊、層析膜、吸水紙、背板等結構組成。在層析膜上固定有羊抗鼠多克隆抗體（質控線）和P24鼠單克隆抗體（檢測線）；在金標墊上固定有膠體金標記的另外一株P24鼠單克隆抗體。待測樣品滴加到樣品墊，通過毛細作用泳向金標墊，到達金標墊后，樣品中的P24蛋白與金標墊鼠抗P24單克隆抗體結合形成復合物。復合物移動到檢測線時，被檢測線上的另一株P24鼠單克隆抗體所捕獲。隨著被捕獲的復合物的堆積，在檢測線上呈現出酒紅色。當復合物泳動到質控線，羊抗鼠多抗捕獲膠體金標記的鼠單克隆抗體，呈現酒紅色。通過判讀層析膜上檢測線和質控線是否顯色，判斷樣品中是否存在P24抗原。當樣品中P24濃度變化時，檢測線顏色的深淺與P24濃度呈正相關，通過與比色卡比較，可以半定量待檢標本中P24蛋白濃度，并大致估算慢病毒的滴度。

 

 

 

二、用途

1.基于HIV-1的慢病毒載體包裝效率檢測：傳統的慢病毒包裝效率檢測的方法有ELISA法（檢測P24蛋白含量）和Real-time PCR法（檢測核酸拷貝數），這兩種方法都耗時費力，且成本高。本產品使用簡便，檢測時間短，可以隨時對轉染效果進行評估。如在更換培養基時，吸取樣品滴加到試紙上，10-15min后即可判讀結果。因此，使用本快速檢測試紙，可以快速評估轉染效果。

2.基于HIV-1的假病毒包裝效率檢測：同樣含有P24蛋白，在轉染后，可以使用本檢測卡對包裝效果進行快速評估。

 

          

圖1. 檢測卡顯色樣式

 

 

 

 

圖2. 比色卡

 

 

 

*一個慢病毒顆粒（Lentiviral Particle, LP）中約有2000個P24蛋白分子，用以下公式可以計算慢病毒載體的顆粒數（LP）：

一個LP相當于：2000×24×103/(6×1023)g of P24=8×10-5 pg of P24；或者說，1ng P24=1.25×107 LPs（≈1.25×104-5 TU**）

**正常情況下，每100-1000 LPs中會有1個具有感染活性的病毒載體，即1 TU（Transducing Unit）。

注意：上述公式計算得到的LP值是理論值，檢測樣品中含有的游離的P24蛋白可能會使該值偏高。 

提示：通常上清中病毒含量需要超過106 TU/ml，才能確保濃縮純化后得到足夠濃度的慢病毒載體（一般能濃縮150倍左右）。