Immortalized (Conditionally) Mouse Pancreas Epithelial Cells (IMPE)

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BioSafety Level	II
Organism	H-2Kb-tsA58 transgenic mouse
Source Organ	Pancreas
Growth Properties	Adherent
Morphology	Cobblestone-like
Recommended Seeding Density	Recommended split ratio of 1:3
Markers	β-catenin, E-Cadherin, CK8, CK18, CK19
Applications	For Research Use Only
Immortalization Method	Isolated from transgenic mouse carrying a temperature-sensitive simian virus 40 tumor antigen (tsA58)
Description	IMPE is a conditionally immortalized mouse pancreas epithelial cell line isolated from the mouse harboring thermolabile mutation (tsA58) under the control of an interferon (IFN)-γ-inducible H-2Kbpromoter and a temperature-sensitive simian virus 40 large T antigen. The functional expression of the SV40 large T antigen is induced by culturing the cells in vitro in medium containing IFN γ at a temperature permissive (33°C). At a non-permissive temperature (37°C-39°C) or when cultured without IFN γ over 3 passages, the cells cease to proliferate. The IMPE has been shown to produce insulin after transfection with pdx1 and culture in the presence of glucagon-like peptide 1 (GLP1).
Procedure Overview
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Propagation	Use of PriCoat? T25 Flasks (G299) or Applied Cell Extracellular Matrix (G422) is required for cell adhesion to the culture vessels. Grow cells in ECM-coated culture vessels with the following conditions. The base medium for this cell line is Prigrow II medium available from ABM (TM002). To make the completed growth medium, add the following components to the base medium: 5% fetal bovine serum (TM999), 5 U/ml murine IFN-γ and 1% Penicillin/Streptomycin (G255). Atmosphere: air: 95%, CO?: 5%; Temperature: 33.0°C.
Preservation	1. Freeze Medium: Complete growth medium with 20% FBS and 10% DMSO. 2. Storage Temperature: Liquid nitrogen vapour phase.
Quality Control	1) Western Blot and immunofluorescence were used to detect the presence of SV40 large T antigen; 2) Western Blot was utilized to detect the expression of epithelial markers E-Cadherin and β-catenin; 3) RT-PCR was used to verify the expression of CK8, CK18 and CK19.
Disclaimer
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