Immortalized Human Adrenocortical Cells- hTERT

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BioSafety Level	II
Organism	Homo sapiens
Source Organ	Adrenal gland
Growth Properties	Adherent
Recommended Seeding Density	Thaw entire contents into an appropriate T25 flask as specified in the Propagation instructions.
Applications	For Research Use Only
Immortalization Method	Serial passaging and transduction with recombinant lentiviruses carrying hTERT gene
Description	The human adrenal cortex plays an important role in regulating the endocrine system by secreting glucocorticoids, mineralcorticoids and adrenal androgens in response to environmental stimulation. The Immortalized Human Adrenocorticol Cells- hTERT is established from primary cells (isolated from a healthy kidney donor) using retrovirus carrying hTERT gene. These cells are useful in studies involving the biochemical and molecular mechanisms associated with adrenal steroidogenesis and adrenal physiology.
Procedure Overview
Image
Propagation	Use of PriCoat? T25 Flasks (G299) or Applied Cell Extracellular Matrix (G422) is required for cell adhesion to the culture vessels. Grow cells in ECM-coated culture vessels with the following conditions. The base medium for this cell line is Prigrow IV medium available from ABM (TM004). To make the completed growth medium, add the following components to the base medium: 10% fetal bovine serum (TM999), 10% heat-inactivated horse serum, 0.1ng/ml recombinant Human FGF2 (Z101455) and Penicillin/Streptomycin (G255). Atmosphere: air: 95%, CO?: 5%; Temperature: 37.0°C.
Preservation	1. Freeze Medium: Complete growth medium with 20% FBS and 10% DMSO. 2. Storage Temperature: Liquid nitrogen vapour phase.
Quality Control	1. Telomerase repeat amplification protocol (TRAP) assay was performed to measure telomerase activity in the immortalized cell line. 2) RT-PCR was used to quantify telomerase RNA component (TERC) expression in the immortalized cell line.
Disclaimer
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